鸡胰岛素降解酶基因环状转录本克隆及其表达规律

栏目:文章 发表于:2020-05-23 01:02查看: 7
本课题组前期【通过】高通量测序【发现】,鸡胰岛素降解酶(insulindegradingenzyme,IDE)基因【可能】【存在】【一个】环状转录本。为【确定】IDE基因环状转录本(circI...
本课题组前期【通过】高通量测序【发现】,鸡胰岛素降解酶(insulin degrading enzyme, IDE)基因【可能】【存在】【一个】环状转录本。为【确定】IDE基因环状转录本(circIDE)的【真实】【存在】,【探究】其表达【规律】,本【研究】以吉林芦花鸡为【研究】对象,【通过】PCR扩增和测序验【证了】circIDE的【真实】【存在】,【通过】RNase R【处理】【和反】转录证【实了】circIDE【的环】形【结构】,【通过】qRT-PCR【分析】circIDE和IDE mRNA【的时】空表达【规律】,并【对比】【分析】了circIDE和线性IDE mRNA在【正常】体型芦花鸡和GHR突变的矮小体型芦花鸡【中的】表达【差异】。【结果】表明:鸡circIDE全长为1332 nt,由IDE基因外显子2~11环化【形成】。RNase R耐受性【分析】表明,鸡circIDE【具备】环形分【子的】【一般】特征,不易被RNase R降解。与oligo-d(T)18引物【相比】,随机引【物对】circIDE【具有】较高【的反】转录【效率】,进【一步】【说明】circIDE【是一】【个不】含poly(A)【的环】状【结构】分子。组织表达谱【结果】表明,circIDE在1周龄和12周龄【正常】体型芦花鸡肝脏和【心脏】高表达,【在胸】肌和腿肌中低表达;circIDE在肝脏组织【的时】序表达谱【结果】表明,circIDE在鸡6周龄之【前为】低表达,在8周龄【以后】【表现】【为高】表达;【正常】与矮小体型芦花鸡品系间circIDE表达量【对比】【分析】表明,【正常】体型芦花鸡circIDE表达水平【高于】矮小体型芦花鸡,【其中】在肝脏组织中【差异】【显著】(P0.05)。本【研究】证【实了】鸡IDE基因【存在】【一个】环状转录本circIDE,并【初步】揭示了circIDE【的表】达【规律】,circIDE在【正常】体型和矮小体型芦花鸡肝脏组织中表达量【存在】【差异】,本【研究】【结果】为【深入】开展鸡circIDE【的生】物学功能及其在鸡生长发育【过程】【中的】【作用】机制奠【定了】【基础】。
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